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A crescita microbiale in ferite spessu manifesta cum'è biofilmi, chì interferiscenu cù a guariscenza è sò difficiuli di sguassà. I novi vestiti d'argentu si dice di cumbattimentu di ferita, ma u so efficacità antibiofilm è l'effetti di guariscenza indipendente di l'infependente sò generalmente scunnisciuti. Utilizendu in vitro è in Vivio Biofilm Modelli di efalocucoCus aureus è pseudomonas Aeruginosa, Rappectate l'effocessiu di i vestiti di manera; Ag1 + U vestitu chì cuntenenu l'acidu etilinudiatetetretraaceticu è / / e-Edta / BC), è u vestitu chì chì cuntene nitrate d'argentu (ag , chì pruduzzioni ag1 +, ag2 + è ag3 + ioni per cumbatte a ferita biofilma è u so effettu nantu à a guariscenza. Ag1 + Dressings anu minimu effetti nantu à a ferita biofilma in vitro è in topi (C57bl / 6J). In cuntrastu, l'ossigenatu ag sals è / / edizione / bc ridotta significativamente u numeru di i batteri viabili in Vitro è dimustratu una riduzzione significativa è EPS in u mouse Sti dragoni avianu effetti sfarenti nantu à a guariscenza di i feriti biofilmi è micca in alto i saltoni più beneficati nantu à i tastu E sfarenti proprietà fisiche di vestiti d'argentu puderanu avè effetti differenti nantu à u feritu di caru è di curazione di u feritu, è questu duv si deve cunsiderà quandu selezziunate un vestitu per u trattamentu di u vestitu.
I feriti cronichi sò definiti cum'è "ferite chì fiascanu di progressà e tappe normale di guariscenza in modu ordinatu" 1. Ferri cronichi creanu una carica psicologica, suciale è ecunomica per i pazienti è u sistema di salute. NHS annuali chì spende nantu à i feriti è i còmorii associati sò stimati à £ 8,3 miliardi in 2017-182. I feriti cronichi sò ancu attualmente un prublema pressante, cù i Stati Uniti, cù u costu annuale di i pazienti di trattà cù ferite à $ 28.8.8 miliardi3.
L'infezzione hè un fattore maiò impedisce a curazione di ferita. L'infezzione manifestanu spessu cum'è Bauxmi, chì sò prisenti in 78% di feriti croniche non-curazione. A forma di biofilma quandu i microrganismi sò affettati irreversibile, cum'è e superfici ferite, è ponu agregatu à a forma di e cumunità extracellulare. U BIOFILM di ferita hè assuciatu cù una risposta inflammatoria inflammatoria chì porta à i danni di i tessuti, chì pò ritardà o prevene a guariscenza4. L'aumentu di u dogu di tissutu pò esse dovutu à l'attività aumentata di Materix Meturile Metalloproteine, Collagenase, Species5 di Elastase è Reattive. D'altrocciu di più, inflamanti sò stessi est cunsumatori è dunque causà caghjiche di tessuti lucali di l'ossigenu di tessuti effettivi
I BIOFILMI Maturi sò alti resistenti à l'agenti antimachiali, chì necessitendu strategie agregali per cuntrullà infizzioni biofilme, cume u trattamentu meccanicu seguita da trattamentu antimoziale efficace. Perchè e BIOFILMS Rapidamente regenerate, i formicrobiali efficaci ponu riduce u risicu di re-formation dopu à u Debridu Surgicu7.
L'argentu hè sempre più utilizatu in u vestitu di l'antimicu è hè spessu usatu cum'è un trattamentu di prima linea per ferite infettate croniche. Ci hè parechji vestiti d'argentu dispunibule, ognuna chì cuntenenu una cumpusizioni d'argentu sfarenti, cuncentrazione, è matrice di base. L'avvanzi in l'arbunds d'argentu anu purtatu à u sviluppu di i novi bracciali d'argentu. A forma metallica d'argentu (ag0) hè inerte; Per ottene l'efficacità di l'antimicrobiali, deve perde un elettronu per furmà l'argentu ionicu (ag1 +). U vestitu tradiziunale di l'argentu cuntenenu l'argentu di l'argentu o l'argentu metallicu chì, quandu esposti à liquidu, decompone à a forma ag1 + ioni. Queste ag1 + ioni reagiscenu cù a cellula bacteriale, caccià l'elettroni da i cumpunenti strutturali o prucessi critichi necessarii per a sopravvivenza. Tecnulugia Patentata hà guidatu à u Sviluppu di Un New Composu di Un Oxissals (Nitrate d'argentu, AG7NI1), chì hè inclusa in u vestitu di ferita. A cuntrastu tradiziunale argentu, a dispomposizione di e sali di ossegen chì cuntene stati d'argentu cù a valenza più alta (ag1 +, ag2 +). I studii vitro anu dimustratu chì e salte bassi di sali d'ossigenati sò più efficenti di i baceri di ioni singunti (AG1 +) SOP BACERIALIE cum'è pseudomonicu, stafilocuculu aerudunu è eschericulanu colli, Un altru novu tipu di vestitu d'argentu include ingredienti addiziunali, chjamatu etylenecoetetetetraacetitica è di benzinazione è di destinà à destinà a penetrazione di l'argentu à a biofilma. Questi novi tecnulugie d'argentu offrenu novi modi per destinà biofilmi di ferita. Eppuru, l'impattu di sti antimicobizie in u circondu indipendente di a carda è a carura indipindente di l'infeppu di cumpiendu chì ùn anu micca creatu un ambiente di ferita scunfurente o di ritardo. Preoccupazioni nantu à a cytotoxicità di u vitro d'argentu sò stati riportati cù parechji vestiti d'argentu10,11. Eppuru, a cistoticaxicità mitro ùn hè ancu traduttu in a tossicazione vvo, è parechje ag4 + vestiti chì anu dimustratu un bonu profilu di sicurezza12.
Quì, avemu investigatu l'efficacità di i vestiti di Carboxymthylculing chì cuntene di furmazione d'argentu di rumane contru a ferita Broofilm in vitro è in Vivio. Inoltre, l'effetti di sti vestiti nantu à e risposte immune è guariscenza indipindente di l'infezzione sò stati valutati.
Tutti i vestiti utilizati eranu dispunibuli cummerciale. 3m Kerrrel Gel Fiber Vestita (3M, Knutsford, UK) hè un telefonu di 100% di CarboxPeThil 100% cmc) di fibre chì hè statu usatu cum'è u cuntrollu di u cuntrollu in stu studiu. Trè vistimenti d'argentu cmcc ignic antimicriati, namigemu 3m Kerracel AG (3M, Knutsford, UK), chì cuntene 1,7 WT%. Salt d'argentu ossigenatu (Ag7no11) in eri d'argentu più altu (Ag1 +, Ag2 + è Ag3 +). Durante a decomposizione di AG7NO11, ag1 +, ag2 + è ag3 + Ioni sò furmati in un ratio di 1: 2: 4. Aquacel Ag chì cuntene ungelicu di 1,2% (Ag1 +) (Convatel, 13 anni) 13 è Aquacel AG - CLORIZZO DI 1.2% SILVER (CONVATTA, deesiede, uk) 14.
Inclì utilizate in stu studio eranu pseudomonas aeruginosa ncc 10781 (Salutebury) e Stafc 65 (Salisburda, NTCC 6571 (Salisbury).
I batteri eranu cultivati durante a notte in u caldo-hinton caldo (Oxoide, Altrincham, Regnu Unitu). A cultura di notte era poi diltuttu 1 di Mueller-Hinton bordo è 200 μm, hoculopore MILFROPORE LTD, Kent, Gran Bretagna LTDD, + Sigma-ALRDRICCIE LTD, + a pigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Gran Bretagna LTD ). ) Formazione B Biofilm Coloniale à 37 ° C per 24 ore. Queste biofilmi culuniali sò stati pruvati per u disgraziatu logaritmicu.
Tagliate u vestitu in 3 pezzi quadrati di CM2 è pre-urigine cù l'acqua di più deionizzata sterile. Mette a bandage sopra a biofilma di a culunia nantu à a placa agar. Ogni 24 ha di BIofilm hè statu eliminatu, è viapara in u BIOFILM (CFU / ML) sò quantificati da u caldo di serie (10-11) di u brodu di u brutta). Dopu 24 ore di incubazione à u 37 ° C, i contatori standard sò stati realizati in piatti di moeller-Hinton agar. Ogni trattamentu è u puntu di u tempu hè statu fattu in triplicate, è i conti di u platu sò stati ripetati per ogni diluzione.
A pelle di u ventre di porcu hè ottinutu da i porchi bianchi di e femine in 15 minuti di u macellu in cunfurmità cù i standard di l'esposizione in l'Unione Europea. A pelle era rasata è pulita cun sipaggi alcol, poi congelatu à -80 ° C per 24 ore à devitalizà a pelle. Dopu à sbarrazzà, 1 pezzi di a pelle cm2 eranu lavate trè Times cù PBS, 0.6% Hypoec Hypochlorite, è 70% ETHANOLU PER 20 minuti ogni volta. Prima di caccià l'epidermi, sguassate ogni etanolu restante in lavà 3 volte in sterile PBS. A pelle era cultivata in una membrana di 6 anni cù una membrana di u nylon di 0,45-μM-μM-μM) in cima è 3 ML Fetal Robine (Sigma) Eagle. Mediu (mediu modificatu di mediu (Dulbecco) - Alrdich Ltd.).
I biofilmi culuniali sò stati cultivati cum'è qualificati per i studii di l'esposizione BIOFILM. Dopu à a cultura di u BIofilm nantu à a membrana per 72 ore, u BIofilmu hè stata applicata à a superficia di a pelle aduprendu un ciclu di inoculazione sterile è a membrana. U BIOFILM era allora incubatu nantu à a derma di u porcu per una 24 ore addiziale à 37 ° C per permette à u Biofilm à a pelle di u porcu. Dopu à a BIOofILM avia matude è uttata, un attellu, un 1.5 cm2 vesturaghju, preguratu cù acqua distillata sterile, hè stata distinata direttamente à u 37 ° C per 24 ore. I batteri viabili sò stati visualizati da un riagenza di cellulare di cellulare prestobosu (invitrogenu, e tecnulugie di vita, paisley, superficia apicativa di ogni esplante per 5 minuti. Aduprate a lettera digitale leica DFC425 à i maghjini cattivi istantaneu nantu à u microscopiu leica Mz8. Areas colored pink were quantified using Image Pro software version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Scaning Microscopia Electron hè stata realizata cum'è descritta quì sottu.
I batteri cultivonu a notte era diluitu 1: 100 in Mueller-Hinton Brot. 200 μll di Cultura hè stata aghjustata à sterile 0.2 μm Whatman Ciclopanu MemBrano (quale hè PIAZZU, UK) è Plastò nantu à Agar Mueller-Hinton. I platti di biofilm sò stati incubati à 37 ° C per 72 ore per permette a furmazione di Biofilma Maturo.
Dopu 3 ghjorni di maturata di biofilma, una portaera quadrata di 3 cm2 Squilla hè statu fattu direttamente nantu à a biofilma è incubatu à u 37 ° C per 24 ore. Dopu avè sguassatu u bandage da a superficia di a cellula BIOFILM, 1 ml di PestoBlue Cell Reagent (invitrogenu, Waltham, Ma) hè aghjuntu à a superficia di ogni biofilma per 20 seconde. E superficia eranu secchi prima chì i cambiamenti di culore sò stati registrati utilizendu una camera di nikon D2300 digitale (Nikon Uk Ltd., Kingston, Regnu).
Preparate e culture in Mueller-Hinton agar, trasferimentu culonei individuale à 10 ml Womine-Hinton both è incubati nantu à un scuzzulatu à 37 ° C (100 RPM). Dopu à ONT incubazione, a cultura era diltutu 1: 100 in u muru di Mueller è 300 μL circular @man internation-hinton agar è incubata à 37 ° c à 72 ore . . A Biofilma Maturu hè stata applicata à a ferita cum'è descritta quì sottu.
Tutti i travagli cun l'animali sò stati purtati à l'Università di Manchester sottu un Licenza di u Prughjettu appricatu da l'uffiziu è a revisione di u benessere (P8721bd27) è in cunfurmità cù l'uffiziu di u 2012. Tutti l'autori aderiscenu à e linee di l'arrivu. Ottu settimane c57bl / 6j topi (Envigo, Oxone, UK hè statu usatu per tutti in Vivo Studi. I termichi eranu anestesizati cun attenzione ISOFLURANE (PIMAL Critiche, West Draylton, a Nu) è e so superficie sò rasati è puliti. Ogni mouse hè stata doppia una ferita excisazione di 2 × 6 mm usendu una biopsia stiefel (Schuuco Internationale, Hermordshire, UK). Per e ferite infettate di BIOFILM, applicà u biofilmu di Colonianza di 72 ore nantu à a membrana cum'è deskritta sopra à a foglia dermana di a ferita utilizendu un ciclu di inoculazione sterile dopu a ferita. Un centimetru quadratu di u vestitore hè pre-umitu cù l'acqua sterile per mantene un ambiente di ferita umida. L'accessorii sò stati appiicati direttamente à a morte è coperto cù 3m, bracknell, Unk) è mastest sinceried adostriva, a slantdale, mi) in quantu à mastdine, mi) apldale, miez. Buprenorphine (nalcare, York, Solu) hè statu amministrata à una cuncentrazione di 0.1 Mg / KG cum'è analgesico. CULL TRES Trè ghjorni dopu a ferita utilizendu u Metudu di Pianificazione 1 è sguassate, a metà, è guardà l'area di ferita cum'è necessariu.
L'ematoxilina (termofisher scientificu) è eosin (termofisher scientificu) staining hè stata realizata secondu u protocolu di u fabricatore. A zona di ferru è a vita hè stata messeficata aduprendu versione di stampa pro software 10 (Media Cybernetici Inc, Rockville, MD).
Imidi difende in Xylene (Thermofisher Scientificata, UK), Regnu, UKOND, etanolu piratevule, è brevemente cigenti). L'immusoestOchemistderia hè stata realizatu utilizendu a Vetastí Elite ABC PK-6104 LIX (LIMILATURA PULI, BORNINGNE, CA) secondu u Protocolu di u Maturi. Antiboide primari per neutruzioni nimp-r14 (termercoware scientificu) è macrophages MS Cd107B PUre M3/10 / 84 (SOLOSTENEST BE.TÀ, seguitu da 2 antiboDies Antibate ABC è Vettor Nova PerOxidase (HRP) laboratoriu di sustrate (vettore laboratori, burlinguame, CA) è contastati cun l'ematoxylin. L'imagine sò stati acquistati utilizendu un microscopiu olimpiu bx43 è un olympus dp73 cameragitale digitale (occuppe, sour southded-on-see ,k).
I mostri di a pelle sò stati fissi in 2,5% glautaraldeHide è 4% formaldeide in 0,1 m hepes (ph 7.4) per 24 ore à 4 ° C. ° E mostri sò stati delidratedendu l'ethanolia gradata è secca in CO2 usendu un mechinu criticu Ltd, Loughton, alloghju è sputter mouly / glow dispome. E spettacine eranu imposti utilizendu un frusi quante fanta microscopò di l'elettronica (iCIUMFISHER) per visualizà u puntu cintrale di a Ferita.
Toto-1 Iodide (2 μm) hè stata appiicata à a superestra feriata mora è incubata per 5 min à 37 ° C (trattatu cù SyPo-60 (10 μM) à u 37 ° C (termofisher scientificu). I stampi di 15 minuti z-pila sò stati creati utilizendu una Lica TCS SP8.
I dati biologichi è tecnichi sò stati tabulati è analizati utilizendu un prugrammi di PRISP (Graphpad, LA JOLLA, PA). L'analisi di una sola manera di varianza cù parechje paraguni usendu u test HOC di Dunntett hè stata aduprata per pruvà per e differenze trà ogni trattamentu è u vestitu di cuntrollu micca antimpropiali. Un valore P <0.05 era cunsideratu significativu.
L'efficacità di i vestiti fibrosi d'argentu hè statu valutatu contr'à i culunii di bifilme di e stafilococcobulu Aureus è pseudomonas aeruginosa in vitro. U vestitu d'argentu cuntenenu diverse forme d'argentu: I vestiti tradiziunali di l'argentu pruduce ag1 + ioni; vestiti, chì pò pruduce ag1 + ioni dopu l'aghjunzione di empta / bc è distruge u materiale biofilm è esposta a batterie à l'argentu. Ions15 è i vestiti chì cuntenenu sali ossigenati ag1 chì pruduce ag1 +, ag2 + è ag3 + ioni. A so efficacità hè stata paragunata cun un vestitu di cuntrollu micca antimicrobiale fattu da fibre gelatiche. E batterie viable viable in u biofilmu sò stati valutati ogni 24 ore per 8 ghjorni (Figura 1). U ghjornu di u ghjornu 5, u BIofilmu hè statu reinoculatu cù 3,85 × 105 anni. Staphylococcus aureus o 1.22 × 105p. aeruginosa per valutà a ricuperazione di biofilm. In paragunatu à i vestiti di cuntrollu di micca imicrobiali, ag1 + effettu hà avutu una vèbbida minima nantu à stafacomucocco aureus è pseudomonane aeruginosa biofilmi più di 5 ghjorni. In cuntrastu, u vestitu chì chì cuntenenu oxygenated AG è Ag1 + + EDTA / BC di uccisu in u bacteria in 5 ghjorni. Dopu a inoculazione ripetuta cù batterie planktoniche in u ghjornu 5, senza restaurazione di a biofilma hè stata osservata (Fig. 1).
Quattazione di batteri viaable in pausaducosuculu Aureus è pseudomonas Air Pseudomonose Biofilmi aeruginosa dopu u trattamentu cù i Vestiti d'argentu. I culonii di bifilmu di stafiloconiu aureus è pseudomonas aeruginosa sò stati trattati cù vesti d'argentu o un vestamentu di cuntrollu elettropu, è u cersuma battererie recadendu era determinante tutti 24 ore. Dopu à 5 ghjorni, u BIofilmu hè statu reinoculatu cù 3,85 × 105 anni. Staphylococcus aureus o 1.22 × 105p. Culunie di e bacterioplankton pseudomonas aeruginosa sò stati furmati individualmente per valutà a ricuperazione di biofilm. I grafici mostranu significanu +/- errore standard.
Per visualizà l'effettu di i vestiti d'argentu nantu à a viabilità di biofilm, i vestiti sò stati appiicati à e Biofilmi maturi cultivate nantu à a pelle porcina ex vive. Dopu 24 ore, u vestitu hè cacciatu è u piricò hè strettu cun tinta riquitta blu, chì hè metabolizzatu da i batteri viventi à un culore rosa. I biofilmi trattati cù i vestiti di cuntrollu eranu rosa, chì indicanu a presenza di i batteri viabili in u BIOOFILM (Figura 2a). In cuntrastu, u Biofilma trattò cù l'Oxise di A Tim Stading A colazione blu è rosa hè stata osservata in a biofilma trattò cù i vestiti di AG1 + - --Comontenziu di a presenza è di edizioni E zoni chì indicanu ùn sò micca affettati da u vestitu d'argentu (Figura 2d). Quantificazione di e zoni attivi (rosa) è inattivi (blu) mostranu chì u patch di cuntrollu era u 75% attivu (Figura 2e). Ag1 + + Edta / Bc Dressings cumpegnati in modu di l'ossegenata AG Saltings à l'orgia, cù tate di survival di 13% è u 14%. L'ag1 + vestitu hà ancu riduttava una viabilità batterica ridotta da u 21%. Questi biofilmi sò stati dunque osservati utilizendu scanning microscopia elettronica (SEM). Dopu u trattamentu cù u vestitu di u cuntrollu è l'Ag1 + u vestitu, una capa di Pseudomonas aeruginosa. Dopu à trattamentu, pochi 2f I fibri di collagen ponu esse cunsiderate cum'è a struttura di tessuti di a pelle porcina (figura 2g). Dopu trattamentu cù ag1 + + edta / bc veste, plaques bacteriali è sottostanti fibre fibre fibre eranu visibili (Figura 2i).
Visualizazione di Pseudomonas Biofilme Aeruginosa dopu u trattamentu di vestitu d'argentu. (A-d) Viabilità batterica in Pseudomonas AirGinosa Biofilms cresciutu nantu à a pelle porcina hè stata visualizata a tintazione di Visabble Viabble 24 ore dopu à u vestitu di cuntrollu d'argentu. I batteri in diretta sò rosa, i batteri non vivibili è a pelle di porcu sò blu. (E) quessificazione di pseudomonas biofilmi Aeruginosa impieghjate e pelle porcina (spot rosa) usando scanning cun un vestitu elettricu o un vestitu di cuntrollu d'argentu per 24 ore. SEM SEMPRE BAR = 5 μm. (J-m) BIOFILMS COLONIALI CREATI IN FilTERSI È ERAINTATI CON PRESTABRUE REACACIFION REACACIFIVE DOPO DOPO DI INTTUBAZIONE CON VOSTAZIONI SILVER.
A determinà se u cuntattu vicinu trà i vestiti è e bisofilmi hà fattu l'efficacia, i biofilmi culuniali pusonu nantu à una superficia plana sò stati trattati cù 24 ore è poi macchiati. U biofilmu micca trattatu era u culore rosa scuru (Figura 2J). In cuntrastu à i biofilmi trattati cù i vestiti chì cuntenenu i saletti ossigenu in l'ag1), i biofilmi chì cuntenenu ag1 + + edta / bc hà dimustratu bande di bande (Figura 2L, m). Questa colorazione rosa indica a presenza di rafinia viable è hè assuciatu cù a zona suture in u vistitu. Questi zoni di cusuri creanu spazii morti chì permettenu di batterie in a biofilma per sopravvive.
Per evaluà l'effettività di i vestiti d'argentu, chjassi micca à u schentuale di thianu di i topi maturi di u trenu aeruug è l'auraginosa. Dopu à 3 ghjorni di trattamentu, analisi macroscopica hà mostratu si mostra più chjucu quand'ellu hè trattatu cù un vestitu di salitu d'ossigenudatu cun ottone di cuntrollu d'argentu (Figura 3a-H). Per cunfirmà queste observations, feriti sò a ferite è reepitelizione sò marissati à l'ematogialina è eosin tessuti di l'imaghjini
L'effettu di i vestiti d'argentu nantu à a superficia di a ferita è di epitelializazione di e ferite infettate cù e biofilmi. (A-H) piccule cellule infettate da Baux imiudomi di Pseudomonas aeruginosa aeruginosa aeruginosa aureus cù un vestitu di cuntrollu micca intestazione, un ossicenatu di u vestitu di ossicane, è un ag1 + vestitu. Images carroscopici riprisentanti. feriti di topi cù ag1 + + edta / bc vestitu. (Il) Rappresentante Pseudomonas Aeruginosa Inferenza AERUGINOosa maculata di l'ematoxilini è eosin, usatu per quanti elevati di ferraghju. Quantificazione di l'area di ferita (m, o) è u percentuale di i feriti infettati con pseudomonas aeruginosa aeruginosa aUREUS (O, P) BIOFILMS (per gruppu di trattamentu n = 12). I grafici mostranu significanu +/- errore standard. * significa p = <0.05 ** significa p = <0,01; Scala Macroscopica = 2,5 mm, scala histologica = 500 μm.
Cosa quistificata di area di feritu in feriti infettati da Pseudomonas BOOFILM (FUCTIONE MISTAVA TRUE. righjuntu significatu statìsticu (figura 3m). p = 0.423). Feriti trattati cù Ag1 + o Ag1 + + EDTA / BC ùn hà dimustratu nisuna riduzione in a zona di ferita (3,1 mm2 è 3,6 mm2, rispettivamente). Trattamentu cù l'ossigenatu per u vestitu agitu à u re-epitelializazione di u vestitu più grande di u vestitu di cuntrollu micca antimicrobiale (34% è 15%; p = 0.029) è ag1 + o ag1 + bc (10%) ( Figura 3n). . , rispettivamente).
E tendenzi simili in a ferratura di ferita è l'epiteliale sò stati osservati in feriti infettati da i biofilmi di S. AUOREUS (Figura 3O). U vestitu chì si cuntenenu sali d'argentu di ossegenati (2.0 mm2) di 23% in paragunatu cù u cuntrollu di u vestitu non-ingraccu (26 mm2), ancu chì sta riduzzione ùn era micca significativa (p = 0.30). Inoltre, a zona di ferita in l'ag4 + u gruppu di trattamentu hè statu ridutta ligeramente (2,4 mm2), mentre a ferita hà trattatu cù AG1 + + EDTA / BC Area (2.9 mm2). Sali Oxygen di AG hà prumessu di e ferite di e ferite di S.% AUURAUS (31%) in più grande di i vestiti trattati (12%) (Figura 3p). Ag1 + VESTU (16%, P = È Ag + edizione / Vista à BC (14%, P =
Per visualisà l'effettu di u vestitu di l'argentu nantu à a matrice di u bicofilma, toto 1 è SYPO 60 Iodu hè stata realizata (Fig. 4). Toto 1 Iodide hè un tinte impermibile cellulare chì pò esse adupratu per visualizà accuratamente acidi nucleichi extracellulari, chì sò abbundanti in eps di biofilmi. SYPO 60 hè un tintu per permeable cellulare utilizatu cum'è un crestellu16. Observa di Toto 1 è Syro 60 Iodide in feriti à Ferruvulate di a Baux: AUREUGININA (FUCCANE-L) cuntenendu sals ossigenu ag è ag1 + + edizione / bc. Ag1 + U vestitu micca un tonalità anticidiofilme addiziale ridutta informulamente ridutta in bocca con u seru inoculi da Pseudomonas cù Pseudomonas a Cureugina, ma eranu menu effetti in ferite cù una furgine di staftiva cù Aureus di stafilocuccianu.
In l'imaghjini vivo di ferita biofilm dopu 3 ghjorni di trattamentu cù u cuntrollu o l'argentu. Improduzzione confucale di Pseudomonas aeruginosa (A-D) è stafilocucoccus (verde) per visualizà acidi nucleichi estrarulari. Per macchia l'acidi nucleichi intractellari, utilizate SYPO 60 (Red). acidi. P. Scanning Microscopia di l'Eccicatura di Pseudomonas AERUGINONA (E-H) AUREUS (M-P) BIOFILMS dopu 3 ghjorni di trattamentu è d'argentu. SEM SEMPRE BAR = 5 μm. Barra di Image Confocal Bar = 50 μm.
Scannente micriculopia micricula mostrata chì topi particular con culonie di Pseofilmi di Pseudomonas aerutura (Figura 4E-h) è una ferita à u trattamentu cù tutti i vestiti d'argentu.
Per evaluà l'effettu di u vestitu di l'argentu in i topi infettati di BIOFILM-infettate di BIOOFILM Determinazione quantitative di neutrofilli è macrofoni internamente. tessuti di granulazione. Figura 5). Tutti i vestiti d'argentu ridotti u numeru di neutrofili in ferrophages infettati cù Pseudomonas aeruginosa in paragunatu cù i vestiti di cuntrollu micca antimicrobiali dopu trè ghjorni. Tuttavia, trattamentu cù u vestitu d'argentu ossigenitu hà risultatu in una riduzione più grande in i neutrofili (P = <0.0001) è p = <0.0001) cumparatu cù l'altri vestiti d'argentu (Figura 5I, J). Eppuru AG1 + + EDTA / BC hà avutu un effettu più grande nantu à a ferita biofilma, hà riduciutu i livelli di neutrofi è brutro à una minima di menu di l'ag1 +. Ferite moderate infettate da S. AUREUS BIOFILM eranu ancu osservati dopu à u vestitu cù AG (P = 0.0008) è ag1 ++ edta / bc (p = ossa 0.0043) Oxicoli in paragunà. I tendenzi simili sò osservati per neutropenia. bandage (Fig. 5K). Tuttavia, solu l'ossicativu ag saling in saldà in u numeru significativu in u numeru di macrophaggi in u tessulu di granulazione inforatu da S. p = 0.0339) (Figura 5l).
I neutrofili è i macrofenu sò stati quantificati in ferite infettate cù Pseudomonas aeruginosa è stafilocococcus Auoreus BIofilmi dopu 3 ghjorni di trattamentu o di cuntrollu di argentu. I neutrofili (annunci) è macrofenu (eh) sò stati quantificati in sezzioni di tessuti macchiati cù l'anticorpii specifichi per neutrofii o macrofagi. Quantificazione di neutrofilli (i è k) è macrofals (j è l) in ferite infettate cù pseudomonas aeruginosa (i è j) è stafilocucoccus aureus (k & l) boiofilmi. N = 12 per gruppu. Grafichi mostranu significativu +/- errore standard, valori standard cumparatu à u vestitu di cuntrollu micca antibattivu, * significa p = <0.05, ** significa p = <0,01; *** significa p = <0.001; indica p = <0.0001).
Dopu avemu valutatu l'effettu di i vestiti d'argentu nantu à a guariscenza indipendente. I feriti escursionali micca infettati sò stati trattati cun un vestitu di cuntrollu micca antimicrobiali o un vestitu d'argentu per 3 ghjorni (Figura 6). Trà i vestiti d'argentu testati, solu ferite trattati cù l'ossigenatu di u sali di saluti apparsu u più chjucu nantu à l'imaghjini macroscopici chì i feriti trattati cù u cuntrollu (Figura 6A-D). Quantificazione di zona di ferita aduprendu l'analisi histologica chì a zona di ferita media dopu à l'ossise di l'ossimazione hè stata trattata cù u gruppu di cuntrollu, ma sta differenza ùn hà micca righjuntu significatu (P = 0.488) (Fig . 6i). In cuntrastu, nena riduzione in l'area ferita era osservata dopu à u trattamentu cù ag1 + (3.38 mm2, p = 0.757) o ag1 + edta / bc (p = 0.05) U salva d'epita era osservata cù u ossondol di l'oxessol in comparitu in compitu (30% vs 22%, rispettu), ancu s'ellu questu ùn hè micca ghjunta significativa, quantuncu micca righjuntu risultati precedenti. Un vestitu cù oxysol prumove re-epitelializazione. -Epitelizazione di ferite micca uninfettate17. In cuntrastu, u trattamentu cù Ag1 + o Ag1 + + EDTA / BC ùn anu micca effettu o mostrò diminuitu re-epitelializazione cumparatu à u cuntrollu.
Effettu di u vestitu d'argentu di a guariscenza di ferita in i topi ininfettati cù a reseczione cumpleta. (AD) rapprisentativu imaghjini da feriti di feriti dopu trè ghjorni di trattamentu cù un vestitu di cuntrollu micca antimattivu è un vestitu d'argentu. (Eh) riprisentante sezioni ferite arricchita di Hematoxylin è eosin. Quantificazione di l'area di ferita (i percentuale di e reepitelializazione (J) sò stati calculati da a mossa di a ferita di a ferita utilizendu u software di l'analisi di l'immagine (N = 11-12 per u gruppu di trattamentu). I grafici mostranu significanu +/- errore standard. * significa p = <0,05.
L'argentu hà una longoria d'usu cum'è una terapia animicrido in guariscenza di u furia, ma e maniche di sfarenti formemuadali è i metudi di consegna ponu risultà in differenze in l'efficacativu antimrobial in 18. Inoltre, l'anticidiofilm pruprietà di i sistemi di spedizione d'argentu specifici ùn sò micca capiti. Eppuru chì a risposta immune osteria hè relativamente efficace contru i batteri piannii, hè generalmente menu efficace contr'à a biofilma19. I batteri planktonic sò prestu fagocativati da i macrofoni, ma in i cellulini attivate, in attrezione di e cellule addiziunali à l'aposta è di liberazione di a risposta immunata. Hè stata osservata chì alcuni Leukocytes ponu penetrà biofilms21 ma sò incapaci di fagocytose una volta chì sta difesa hè cumprumisa22. Un approcciu olisticu deve esse usatu per sustene a risposta immune ospitante contr'à l'infezione biofilma di u feritu. A preghjudiziu ferita pò fisicamente a biofilme è a vostra risposta bioburden, ma a risposta immune pò esse inefficace contr'à a risposta resta Cusì, terapii antimichi cum'è i vestiti d'argentu ponu sustene a risposta immune è eliminà l'infezioni di biofilma. Cumpusizioni, cuncentrazione, solubilità, è a sustanza di consegna pò influenzà l'efficacità di l'argentu antimicrobiali. In l'ultimi anni, avances in a tecnulugia di trasfurmazioni d'argentu anu fattu sti vestiti più efficaci9.23. Cum'è indipindenti di tecnologe d'argentu, hè impurtante di capisce l'effettività à l'infpe di u cuntenutu di cuntrullassi è, più impurtanti di queste forme putenti è di a calazione.
In stu studiu, avemu paragunatu l'efficacità di i dui vestiti d'argentu avanzati cun Vestimenti d'argentu convenciali chì pruduzzioni contr'à i biofilmi usanu diverse in vitro è in mudelli di vitro è in i vvro. Avemu ancu valutatu l'effettu di sti vestiti in l'ambiente di a ferenza è a carura indipendente-infependente. Per minimisà l'influenza di a matrice di spedizione, tutti i vestiti d'argentu sò stati cumposti di carboxymethylcleulle.
A nostra valutazione preliminaria di questi vestiti culunenti contra i biofilmi culuniali di Pseudomonas a Cureuginosa è i Sacri elettrici, sò effettivi in i bacterii di Batteria BC è effettivamente BCOWILM in pochi ghjorni. Inoltre, sti vestiti impediscenu a reinturazione di a biofilma nantu à l'esposizione ripetuta à e batterie planda. L'ag4 + u vestitu d'argentu cuntenutu, u listessu cumpostu d'argentu è ag1 + + EDTA / BC, è hà avutu un effettu limitatu nantu à a biofilma in u stessu periodu. L'observazione chì una osservazione ag1 + + edta / bc hè stata più efficace di u vestitu cumpostu di a stessa matrice è un ingredienti d'argentu hè necessariu per aumentà a chioffezza in altrò. Questi risultati sustenenu l'idea chì bc si ghjucanu un rolu supplementu contribuitu per unisce l'efficacità è chì l'abseenza di sta cumpunità in ag1 + vestiti per dimustrà in l'efficacità di vitro. Avemu trovu chì l'ossigenatu di l'ossigenu ag2 + è Ag3 + IONS Exhibitu l'efficacità Antibacteriale più forte chì Ag1 + è à i livelli simili à Ag1 + + EDTA / BC. Tuttavia, à causa di u putenziale di riposu à altu, ùn hè micca chjaru quant'è l'ag3 - ioni ferma attivu è efficace contr'à i biofilmi di ferita è dunque meritu più studiu. Inoltre, ci sò parechji vestimenti sfarenti chì generanu ag1 + ioni chì ùn eranu micca testati in stu studiu. Questi vegatori sò cumposti di fondenti d'argenti, cuncentrazioni, è matricate di basazioni, chì ponu influenzioni e consegna di a spedizione di punte è a so efficace Ne vale ancu a pena di nutà chì ci sò parechje diverse in vitro è in mudelli di Vivo utilizonu per evaluà l'effettività à uttings in brusofili. U tipu di mudellu usatu, cume u cuntenutu di u sali è di prutechi di i media utilizate in sti mudelli, influenzianu a efficace di u vestitu. In u nostru mudellu in vivo, avemu permessu à a biuofilma in triru in vitro è trasfirrata à a superficie derma di a ferita. A risposta immunica di u mouse hè relativamente efficace contr'à i batteri planktonici applicati à a ferita, per mezu di un biofilm cum'è i guardii feriti. L'aghjunzione di a biofilma maturu à una ferita limita di l'efficacità di l'immunità di l'ospese à a furmazione di biofilma per permettà a biofilma maturu per stabilisce in a ferita prima di cumincià. Cusì, u nostru mudellu permette di valutà l'effocità di i vestiti antimrodu nantu nantu à biofilmi maturi prima di i feriti cumincianu à guarisce.
Avemu ancu trovu chì u vestitu hà influitu l'efficacezza di i vestiti d'argentu in i biofilmi di vitro-girà è a pelle porcina. U cuntattu Chiudi cù a ferita hè cunsiderata critica per l'efficacità di l'analimodu di u vestitu24,25. U vestitu chì si cuntenenu ossigenati agi salii in bicicletta close cù bicofilmi maturi, risultatu in una riduzzione significativa in u numeru di batterie viable dopu 24 ore. In cuntrastu, quandu hè trattatu cù AG1 + è ag1 + + Edta / Bc di misteri di viable d'Atactia Viaghja. Sti vestiti cuntenenu suturi longu a durata di u vestitu, chì crea spazii morti chì impediscenu u cuntattu cù u BIOFILM. In i nostri studii di vitro, sti zone non cuntattate impedì l'uccisione di e batterie viable in u biofilimu. Avemu valutatu a viabilità batterica solu dopu 24 ore di trattamentu; À u tempu, cum'è u dressitu diventa more saturatu, ci pò esse menu spaziu mortu, ridendu a zona per questi via di via di viable. Tuttavia, issu calcutà l'impurtanza di a cumpusizioni di u vestitu, micca solu u tippu d'argentu in u vestitu.
Mentre in studiiit vitro sò utili sò utili à parcuriere l'effetti di sfarenti tecnulugia d'argentu, hè impurtante à esse i prudutti di i BUXOFILMI in i risultati di u vestitu contru à i petroni contru i biofilmi. L'effettu di sti biciclette nantu à a ferita hè osservata utilizendu Scaning Microscy è Eps Strainzione di u BIOFILM usendu tena intracellulare. Avemu trovu chì dopu 3 ghjorni di trattamentu, tutti i vestiti eranu efficetti in ferite senza gamma di cellulari, ma l'ag1 + vestiti in i feriti infeziunali. Scanning micritivu micritorio hà dimustratu ancu significati chì i feriti significativamente assai battiti cù i Viste d'argentu, ossetitu di u vestitu di bruitu è u agnicu + BC in parogatu cù l'Ag1 + Vestitu. Queste dati mostranu chì i dressings d'argentu hà testatu avia variing grazie di impattu annantu à struttura biofilma, ma nimu di i vestiti di enercu, susteneva a trattamentu di u trattamentu di a fermazione di ferita usu di braccia d'argentu. U trattamentu hè precedutu da un detrittu fisicu per caccià a maiò parte di a biofilma.
I feriti cronichi sò spessu in un statu di inflamazioni severi, cù e cellule inflammatiche in l'estensione per un periodu di tessulu è di rende u metabolismu di u tessulu è di a ferita in a ferita. Bauxs aggravendu stu ambiente di ferita ostile in una tavola negativamente in una varietà di manere, cumprese inhibizione di proliferazione di cellula è di attivazione di Proinflamatori27. Siccomu i vestiti d'argentu diventanu più efficaci, hè impurtante di capisce l'impattu chì anu nantu à l'ambiente di ferita è a guariscenza.
Interessante, benchia tutti i dressings d'argentu affaccati a cumpusizione di Baux Questi dati sustenenu a nostra ricerca precedente17 è quelli di Kalan et al. (2017) 28, chì hà dimustratu prufessi di prufessore di sicurezza è tossicità sali di argentu, cum'è cuncentrazioni più bassi di l'argentu sò stati efficaci contru i biofilmi.
Nostru Studiu di l'studiu currente in ligna in a tecnulugia d'argentu trà vestitu d'argentu è l'impattu di sta tecnulugia nantu à a corazione di a ferita è a carura indipostendente. Tuttavia, questi risultati differ da studi previ chì agghianu chì a e lettera / ederta / bc invucante pigrava e ferrarie ferrate. Tuttavia, questu pò esse à causa di differenzi di mudelli d'animali, volte di misura, metudi di applicazione batteriche29. In questu casu, a misura di ferita sò stati pigliati 12 ghjorni dopu à a ferita per permettà l'ingredienti attivi di u vestitu per agisce nantu à u biofilimu di tempu. Questu hè supportatu da un studiu chì hà dimustratu chì l'ulceri di legnu clinically infettati cù AG1 + BC inizialmente a dimensione dopu à una settimana di trattamentu è dopu à a 4 settimane di 4 settimane di usu di micca antimicrobiali. droghe. I vestiti cmc per riduce a dimensione di ulcers30.
Certi forme è cuncentrazioni d'argentu sò stati mustrati à esse citotoxic in vitro 11, ma questi in risultati vitro ùn Traduce micca sempre in effetti avve in vivu. Inoltre, avanzamenti in a tecnulugia d'argentu è una capiscitura megliu d'argentu è cuncentrazioni in i vestiti di u sviluppu è efficace è efficacati. Eppuru, cum'è l'avances: avancamenti per un vestitore d'argentu, hè impurtante di capisce l'impactu di sti vistimenti nantu à l'ambiente di ferita à l'ambiente di ferita31,32,3. Era prima dichjaratu chì a tarifa aprìa di ri-epitazioni currisponde à una proporzione aumentata di e macrophari m2 di antiplammatori Farottepe di u fenotazione di u minimu. Questu hè statu nutatu in un mudellu di calviu previ, induve vestiti di feriti d'argentu feritu cù l'argentu di i hostogels di l'argentu è micca antimicrobiali è iHdrogels34.
I feriti cronichi ponu esibisce l'inflamazioni eccessiva è hè stata osservata chì a presenza di i neutropiculi eccessivi pò esse deterente per ferisce Healing35. In un studiu in i topi sguassati Neutrofil, a presenza di Neutrophils ritardate Reepitelializazione. A presenza di i neutrofii superiori porta à e proteases di proteases è reattivi ossigenu è a superarexide è idrogina di ferita è ferite à a curazione cronica. Inesè, un aumentu di i numeri di macrofage, se micca cuntrullatu, pò purtà à guidà a guariscenza delimitata. Stu incrementu hè particularmente impurtante se i macrofals ùn sò micca capaci di transizione da un fenotipu pro-cupertu, chì risultanu in ferite di a falla inflammatoria. Avemu osservatu una diminuzione di neutrofoli è macrofagoni in ferrovia infettate di 3 ghjorni cù trattamentu infettati biofilm cù tutte e staggioni d'argentu, ma a diminuzione era più pronunzia à i capelli di battute oxicenata. Sta diminuzione pò esse un risultatu direttu à l'argentu, una risposta per culluncià Bioburden, o a ferita si stà in una stazzunettu più tardi è di dunque immunua in a ferita Riducire u numeru di cellule inflammatoria in a ferita pò mantene un ambiente per a curazione di ferita. Uchisimu d'azione di l'axistica prumove a Healing indettu, ma a capacità di l'oxida è di distruzzione di l'informammazione, pò spiegà questu è hè bisognu di più studiu17.
Feriti infettati cronichi chì ùn anu micca risoltu ferite un prublema per i dui medichi è i pazienti. Eppuru chì parechji vestiti di pretendenza antimicrobiali, a ricerca hè raramente fucalizza nantu à altri fattori chjave influenzendu u microendiu di ferita. Stu studiu mostra chì sfarenti tecnulugia d'argentu anu una efficacità d'identità animicrobali è, importantamenti, sfarenti nantu à l'ambiente di ferenza è di curà, indipendenti di infezioni. Ancu sì in u vitro è in igiovi studii mostranu l'efficacità di serramentu di ferita è di prumove a guariscenza di questi vestimenti in a clinica.
I datasets usati è / o analizati durante u studiu attuale sò dispunibili da l'autore currispondente nantu à a dumanda raghjone.
U tempu post: 15-2024