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A crescita microbica in e ferite si manifesta spessu cum'è biofilm, chì interferiscenu cù a guarigione è sò difficiuli da eradicà. I novi medicazioni d'argentu pretendenu di cumbatte l'infezioni di e ferite, ma a so efficacia antibiofilm è l'effetti di guarigione indipendenti da l'infezzione sò generalmente scunnisciuti. Usendu mudelli di biofilm in vitro è in vivo di Staphylococcus aureus è Pseudomonas aeruginosa, riportemu l'efficacia di e medicazioni generatrici di ioni Ag1+; medicazioni Ag1+ chì cuntenenu acidu etilendiamminotetraaceticu è cloruru di benzetoniu (Ag1+/EDTA/BC), è medicazioni chì cuntenenu nitratu d'argentu (ossisali di Ag), chì producenu ioni Ag1+, Ag2+ è Ag3+ per cumbatte u biofilm di a ferita è u so effettu nantu à a guarigione. E medicazioni Ag1+ anu avutu effetti minimi nantu à u biofilm di a ferita in vitro è in i topi (C57BL/6j). In cuntrastu, i sali di Ag ossigenati è e medicazioni Ag1+/EDTA/BC anu riduttu significativamente u numeru di batteri vitali in i biofilm in vitro è anu dimustratu una riduzione significativa di i cumpunenti batterici è EPS in i biofilm di e ferite di u topu. Queste medicazioni anu avutu effetti diversi nantu à a guarigione di e ferite infettate da biofilm è micca infettate da biofilm, cù e medicazioni di sale ossigenatu chì anu effetti più benefichi nantu à a riepitelizazione, a dimensione di a ferita è l'inflammazione paragunatu à i trattamenti di cuntrollu è altre medicazioni d'argentu. E diverse proprietà fisico-chimiche di e medicazioni d'argentu ponu avè effetti diversi nantu à u biofilm di a ferita è a guarigione, è questu deve esse cunsideratu quandu si sceglie una medicazione per u trattamentu di e ferite infettate da biofilm.
E ferite croniche sò definite cum'è "ferite chì ùn riescenu micca à prugressà attraversu e tappe nurmali di guarigione in modu ordinatu è puntuale" 1. E ferite croniche creanu un pesu psicologicu, suciale è ecunomicu per i pazienti è u sistema sanitariu. A spesa annuale di u NHS per u trattamentu di e ferite è di e comorbidità associate hè stimata à 8,3 miliardi di sterline in u 2017-182. E ferite croniche sò ancu attualmente un prublema urgente in i Stati Uniti, cù Medicare chì stima u costu annuale di u trattamentu di i pazienti cù ferite à 28,1-96,8 miliardi di dollari3.
L'infezzione hè un fattore maiò chì impedisce a guarigione di e ferite. L'infezzioni si manifestanu spessu cum'è biofilm, chì sò prisenti in u 78% di e ferite croniche chì ùn guariscenu micca. I biofilm si formanu quandu i microorganismi si attaccanu irreversibilmente à e superfici, cum'è e superfici di e ferite, è ponu aggregassi per furmà cumunità produttrici di polimeri extracellulari (EPS). U biofilm di e ferite hè assuciatu à una risposta infiammatoria aumentata chì porta à danni tissutali, chì ponu ritardà o impedisce a guarigione4. L'aumentu di i danni tissutali pò esse duvutu in parte à l'aumentu di l'attività di e metalloproteinasi di matrice, collagenasi, elastasi è spezie reattive di l'ossigenu5. Inoltre, e cellule infiammatorie è i biofilm sò elli stessi grandi cunsumatori d'ossigenu è ponu dunque causà ipossia tissutale lucale, impoverendu e cellule di l'ossigenu vitale necessariu per una riparazione tissutale efficace6.
I biofilm maturi sò assai resistenti à l'agenti antimicrobici, ciò chì richiede strategie aggressive per cuntrullà l'infezioni da biofilm, cum'è u trattamentu meccanicu seguitu da un trattamentu antimicrobicu efficace. Siccome i biofilm ponu rigenerassi rapidamente, l'antimicrobici efficaci ponu riduce u risicu di rifurmazione dopu u debridement chirurgicu7.
L'argentu hè sempre più adupratu in e medicazioni antimicrobiche è hè spessu adupratu cum'è trattamentu di prima linea per e ferite infette croniche. Ci sò parechje medicazioni d'argentu dispunibili in u cummerciu, ognuna chì cuntene una cumpusizione, una cuncentrazione è una matrice di basa d'argentu diverse. I progressi in i braccialetti d'argentu anu purtatu à u sviluppu di novi braccialetti d'argentu. A forma metallica di l'argentu (Ag0) hè inerte; Per ottene l'efficacia antimicrobica, deve perde un elettrone per furmà argentu ionicu (Ag1+). E medicazioni tradiziunali d'argentu cuntenenu cumposti d'argentu o argentu metallicu chì, quandu sò esposti à u liquidu, si decomponenu per furmà ioni Ag1+. Quessi ioni Ag1+ reagiscenu cù a cellula batterica, eliminendu l'elettroni da i cumpunenti strutturali o da i prucessi critichi necessarii per a sopravvivenza. A tecnulugia brevettata hà purtatu à u sviluppu di un novu cumpostu d'argentu, l'ossisali d'Ag (nitratu d'argentu, Ag7NO11), chì hè inclusu in e medicazioni per e ferite. À u cuntrariu di l'argentu tradiziunale, a decomposizione di i sali chì cuntenenu ossigenu produce stati d'argentu cù una valenza più alta (Ag1+, Ag2+ è Ag3+). Studi in vitro anu dimustratu chì basse concentrazioni di sali d'argentu ossigenati sò più efficaci chè l'argentu à un solu ione (Ag1+) contr'à i batteri patogeni cum'è Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus è Escherichia coli8,9. Un altru novu tipu di medicazione d'argentu include ingredienti supplementari, vale à dì l'acidu etilendiamminotetraaceticu (EDTA) è u cloruru di benzetoniu (BC), chì sò stati segnalati per mira à u biofilm EPS è cusì aumentanu a penetrazione di l'argentu in u biofilm. Queste nuove tecnulugie d'argentu offrenu novi modi per indirizzà i biofilm di e ferite. Tuttavia, l'impattu di questi antimicrobici nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione indipendente da l'infezione hè impurtante per assicurà chì ùn creanu micca un ambiente di ferita sfavorevole o ritardanu a guarigione. Preoccupazioni riguardu a citotossicità di l'argentu in vitro sò state segnalate cù parechje medicazioni d'argentu10,11. Tuttavia, a citotossicità in vitro ùn s'hè ancu tradutta in tossicità in vivo, è parechje medicazioni Ag1+ anu dimustratu un bon prufilu di sicurezza12.
Quì, avemu investigatu l'efficacità di e medicazioni di carbossimetilcellulosa chì cuntenenu nuove formulazioni d'argentu contr'à u biofilm di e ferite in vitro è in vivo. Inoltre, sò stati valutati l'effetti di queste medicazioni nantu à e risposte immunitarie è a guarigione indipendentemente da l'infezione.
Tutte e medicazioni aduprate eranu dispunibili in u cummerciu. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) hè una medicazione di fibra di gel 100% carbossimetilcellulosa (CMC) non antimicrobica chì hè stata aduprata cum'è medicazione di cuntrollu in questu studiu. Trè medicazioni d'argentu CMC antimicrobiche sò state valutate, vale à dì a medicazione 3M Kerracel Ag (3M, Knutsford, UK), chì cuntene 1,7% in pesu di sale d'argentu ossigenatu (Ag7NO11) in ioni d'argentu di valenza più alta (Ag1+, Ag2+ è Ag3+). Durante a decomposizione di Ag7NO11, l'ioni Ag1+, Ag2+ è Ag3+ si formanu in un rapportu di 1:2:4. Medicazione Aquacel Ag Extra chì cuntene 1,2% di cloruru d'argentu (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 è medicazione Aquacel Ag + Extra chì cuntene 1,2% di cloruru d'argentu (Ag1+), EDTA è cloruru di benzetoniu (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
I ceppi utilizati in questu studiu eranu Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) è Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
I batteri sò stati cultivati durante a notte in brodu Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). A cultura di a notte hè stata poi diluita 1:100 in brodu Mueller-Hinton è 200 µl piastrati nantu à membrane sterili di ciclopore Whatman di 0,2 µm (Whatman plc, Maidstone, UK) nantu à piastre d'agar Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Gran Bretagna).) Formazione di biofilm culuniali à 37°C per 24 ore. Questi biofilm culuniali sò stati testati per a ritirata logaritmica.
Tagliate a medicazione in pezzi quadrati di 3 cm2 è pre-inumidite cù acqua deionizzata sterile. Pone a benda sopra u biofilm di a culunia nantu à a piastra d'agar. Ogni 24 ettari di biofilm sò stati rimossi, è i batteri viabili in u biofilm (CFU/ml) sò stati quantificati per diluizione seriale (da 10−1 à 10−7) in brodu di neutralizazione Day-Angle (Merck-Millipore). Dopu à 24 ore d'incubazione à 37°C, i conteggi standard in piastra sò stati effettuati nantu à piastre d'agar Mueller-Hinton. Ogni trattamentu è puntu temporale hè statu effettuatu in triplicatu, è i conteggi in piastra sò stati ripetuti per ogni diluizione.
A pelle di pancetta di porcu hè ottenuta da porchi femine di taglia Large White in 15 minuti da a macellazione in cunfurmità cù i standard d'esportazione di l'Unione Europea. A pelle hè stata rasata è pulita cù salviette imbevute d'alcol, poi congelata à -80 °C per 24 ore per devitalizà a pelle. Dopu u scongelamentu, pezzi di pelle di 1 cm2 sò stati lavati trè volte cù PBS, ipocloritu di sodiu à 0,6% è etanolu à 70% per 20 minuti ogni volta. Prima di rimuovere l'epidermide, rimuovere qualsiasi etanolu restante lavendu 3 volte in PBS sterile. A pelle hè stata cultivata in una piastra à 6 pozzetti cù una membrana di nylon di 0,45 μm di spessore (Merck-Millipore) sopra è 3 cuscinetti assorbenti (Merck-Millipore) contenenti 3 ml di serum fetale bovinu (Sigma) supplementatu cù u 10% di Dulbecco's Modified Eagle Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium - Aldrich Ltd.).
I biofilm culuniali sò stati cultivati cum'è descrittu per i studii d'esposizione à u biofilm. Dopu avè cultivatu u biofilm nantu à a membrana per 72 ore, u biofilm hè statu applicatu à a superficia di a pelle aduprendu un ciclu d'inoculazione sterile è a membrana hè stata rimossa. U biofilm hè statu dopu incubatu nantu à u derma di u porcu per altre 24 ore à 37 ° C per permette à u biofilm di maturà è aderisce à a pelle di u porcu. Dopu chì u biofilm hè maturatu è attaccatu, una medicazione di 1,5 cm2, pre-inumidita cù acqua distillata sterile, hè stata applicata direttamente à a superficia di a pelle è incubata à 37 ° C per 24 ore. I batteri vitali sò stati visualizati per culurazione applicendu uniformemente u reagente di viabilità cellulare PrestoBlue (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) à a superficia apicale di ogni espianto è incubandolu per 5 minuti. Aduprate a camera digitale Leica DFC425 per catturà istantaneamente immagini nantu à u microscopiu Leica MZ8. E zone culurite in rosa sò state quantificate cù u software Image Pro versione 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). A microscopia elettronica à scansione hè stata realizata cum'è descrittu quì sottu.
I batteri cresciuti durante a notte sò stati diluiti 1:100 in brodu Mueller-Hinton. 200 μl di cultura sò stati aghjunti à una membrana sterile di ciclopore Whatman di 0,2 μm (Whatman, Maidstone, UK) è piastrati nantu à agar Mueller-Hinton. E piastre di biofilm sò state incubate à 37°C per 72 ore per permette a furmazione di biofilm maturu.
Dopu à 3 ghjorni di maturazione di u biofilm, una benda quadrata di 3 cm2 hè stata posta direttamente nantu à u biofilm è incubata à 37°C per 24 ore. Dopu avè cacciatu a benda da a superficia di u biofilm, 1 ml di PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) hè statu aghjuntu à a superficia di ogni biofilm per 20 secondi. E superfici sò state asciugate prima di arregistrà i cambiamenti di culore cù una camera digitale Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Preparate culture di notte nantu à agar Mueller-Hinton, trasferite e culonie individuali in 10 ml di brodu Mueller-Hinton è incubate nantu à un agitatore à 37 °C (100 rpm). Dopu l'incubazione di notte, a cultura hè stata diluita 1:100 in brodu Mueller-Hinton è 300 µl sò stati spottati nantu à una membrana di ciclopore Whatman circulare di 0,2 µm (Whatman International, Maidstone, UK) nantu à agar Mueller-Hinton è incubati à 37 °C in 72 ore. U biofilm maturu hè statu applicatu à a ferita cum'è descrittu quì sottu.
Tuttu u travagliu cù l'animali hè statu realizatu à l'Università di Manchester sottu una licenza di prughjettu appruvata da l'Uffiziu di u Benessere Animale è di a Revisione Etica (P8721BD27) è in cunfurmità cù e linee guida publicate da l'Home Office sottu l'ASPA rivista di u 2012. Tutti l'autori anu rispettatu e linee guida d'arrivu. Topi C57BL/6j di ottu settimane (Envigo, Oxon, UK) sò stati utilizati per tutti i studii in vivo. I topi sò stati anestetizzati cù isofluranu (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) è e so superfici dorsali sò state rasate è pulite. Ogni topu hà ricevutu una ferita escisionale di 2 × 6 mm utilizendu un punch di biopsia Stiefel (Schuco International, Hertfordshire, UK). Per e ferite infettate da biofilm, applicà biofilm culuniale di 72 ore cresciutu nantu à a membrana cum'è descrittu sopra à u stratu dermicu di a ferita utilizendu un ciclu di inoculazione sterile subitu dopu a ferita è scartà a membrana. Un centimetru quadratu di medicazione hè pre-inumiditu cù acqua sterile per mantene un ambiente umitu di a ferita. E medicazioni sò state applicate direttamente à ogni ferita è cuperte cù una pellicola 3M Tegaderm (3M, Bracknell, UK) è un adesivo liquidu Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) applicatu intornu à i bordi per furnisce una adesione supplementare. A buprenorfina (Animalcare, York, UK) hè stata amministrata à una concentrazione di 0,1 mg/kg cum'è analgesicu. Abbattere i topi trè ghjorni dopu a ferita aduprendu u metudu Schedule 1 è rimuovere, dimezzare è almacenà a zona di a ferita secondu i bisogni.
A culurazione cù ematossilina (ThermoFisher Scientific) è eosina (ThermoFisher Scientific) hè stata realizata secondu u protocolu di u fabricatore. L'area di a ferita è a riepitelizazione sò state quantificate cù u software Image Pro versione 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
E sezioni di tissutu sò state decerate in xilene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), reidratate cù etanolu graduatu 100-50%, è immerse brevemente in acqua deionizzata (ThermoFisher Scientific). L'immunoistochimica hè stata realizata cù u kit VectaStain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) secondu u protocolu di u fabricatore. L'anticorpi primari contr'à i neutrofili NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) è i macrofagi Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) sò stati diluiti 1:100 in una soluzione bloccante è aghjunti à a superficia tagliata, seguitati da 2 anticorpi Anti-, VectaStain ABC è u kit di substratu Vector Nova Red Peroxidase (HRP) (Vector Laboratories, Burlingame, CA) è cuntracolorati cù ematossilina. L'imagine sò state acquisite cù un microscopiu Olympus BX43 è una camera digitale Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
I campioni di pelle sò stati fissati in 2,5% di glutaraldeide è 4% di formaldeide in 0,1 M HEPES (pH 7,4) per 24 ore à 4°C. I campioni sò stati disidratati cù etanolu graduatu è secchi in CO2 cù un essiccatore à puntu criticu Quorum K850 (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) è rivestiti per sputtering cù una lega d'oru-palladio cù un sistema di mini sputtering/scarica a bagliore Quorum SC7620. I campioni sò stati ripresi cù un microscopiu elettronicu à scansione FEI Quanta 250 (ThermoFisher Scientific) per visualizà u puntu cintrale di a ferita.
L'ioduru Toto-1 (2 μM) hè statu applicatu à a superficia di a ferita di u topu escisata è incubatu per 5 minuti à 37 °C (ThermoFisher Scientific) è trattatu cù Syto-60 (10 μM) à 37 °C (ThermoFisher Scientific). L'imagine Z-stack di 15 minuti sò state create cù un Leica TCS SP8.
I dati replicati biologichi è tecnichi sò stati tabulati è analizati cù u software Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). L'analisi di varianza à sensu unicu cù paragoni multipli utilizendu u test post hoc di Dunnett hè stata aduprata per verificà e differenze trà ogni trattamentu è a medicazione di cuntrollu non antimicrobica. Un valore p <0,05 hè statu cunsideratu significativu.
L'efficacità di e medicazioni fibrose di gel d'argentu hè stata prima valutata contr'à e culonie di biofilm di Staphylococcus aureus è Pseudomonas aeruginosa in vitro. E medicazioni d'argentu cuntenenu diverse formule d'argentu: e medicazioni tradiziunali d'argentu producenu ioni Ag1+; e medicazioni d'argentu, chì ponu pruduce ioni Ag1+ dopu l'aghjunta di EDTA/BC, ponu distrughje a matrice di u biofilm è espone i batteri à l'argentu sottu l'effettu antibattericu di l'argentu. ioni15 è e medicazioni chì cuntenenu sali d'Ag ossigenati chì producenu ioni Ag1+, Ag2+ è Ag3+. A so efficacità hè stata paragunata cù una medicazione di cuntrollu non antimicrobica fatta da fibre gelificate. I batteri viabili rimanenti in u biofilm sò stati valutati ogni 24 ore per 8 ghjorni (Figura 1). U ghjornu 5, u biofilm hè statu rinoculatu cù 3,85 × 105S. Staphylococcus aureus o 1,22 × 105P. aeruginosa per valutà a ripresa di u biofilm. In paragone cù e medicazioni di cuntrollu senza antimicrobici, e medicazioni Ag1+ anu avutu un effettu minimu nantu à a viabilità batterica in i biofilm di Staphylococcus aureus è Pseudomonas aeruginosa per 5 ghjorni. In cuntrastu, e medicazioni chì cuntenenu sali di Ag ossigenati è Ag1+ + EDTA/BC sò state efficaci in l'uccisione di i batteri in u biofilm in 5 ghjorni. Dopu à inoculazione ripetuta cù batteri planctonici u ghjornu 5, ùn hè stata osservata alcuna restaurazione di u biofilm (Fig. 1).
Quantificazione di batteri viabili in biofilm di Staphylococcus aureus è Pseudomonas aeruginosa dopu u trattamentu cù medicazioni d'argentu. E culonie di biofilm di Staphylococcus aureus è Pseudomonas aeruginosa sò state trattate cù medicazioni d'argentu o medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche, è u numeru di batteri viabili rimanenti hè statu determinatu ogni 24 ore. Dopu à 5 ghjorni, u biofilm hè statu rinoculatu cù 3,85 × 105S. Staphylococcus aureus o 1,22 × 105P. E culonie di u batterioplancton Pseudomonas aeruginosa sò state furmate individualmente per valutà a ripresa di u biofilm. I grafichi mostranu a media +/- errore standard.
Per visualizà l'effettu di e medicazioni d'argentu nantu à a viabilità di u biofilm, e medicazioni sò state applicate à i biofilm maturi cresciuti nantu à a pelle di porcu ex vivo. Dopu à 24 ore, a medicazione hè stata rimossa è u biofilm hè statu culuritu cù un colorante blu reattivu, chì hè metabolizatu da i batteri viventi in un culore rosa. I biofilm trattati cù medicazioni di cuntrollu eranu rosa, indicendu a presenza di batteri viabili in u biofilm (Figura 2A). In cuntrastu, u biofilm trattatu cù a medicazione Ag oxysols era principalmente blu, indicendu chì i batteri rimanenti nantu à a superficia di a pelle di u porcu eranu batteri non viabili (Figura 2B). Una culurazione mista blu è rosa hè stata osservata in i biofilm trattati cù medicazioni chì cuntenenu Ag1+, indicendu a presenza di batteri viabili è non viabili in u biofilm (Figura 2C), mentre chì e medicazioni EDTA/BC chì cuntenenu Ag1+ eranu principalmente blu cù alcune macchie rosa, indicendu zone micca affettate da a medicazione d'argentu (Figura 2D). A quantificazione di e zone attive (rosa) è inattive (blu) hà dimustratu chì u patch di cuntrollu era attivu à 75% (Figura 2E). I medicazioni Ag1+ + EDTA/BC anu avutu risultati simili à i medicazioni cù sali d'Ag ossigenati, cù tassi di sopravvivenza rispettivamente di 13% è 14%. A medicazione Ag1+ hà ancu riduttu a viabilità batterica di u 21%. Quessi biofilm sò stati poi osservati cù a microscopia elettronica à scansione (SEM). Dopu u trattamentu cù a medicazione di cuntrollu è a medicazione Ag1+, hè statu osservatu un stratu di Pseudomonas aeruginosa chì copre a pelle di porcu (Figura 2F,H), mentre chì dopu u trattamentu cù a medicazione Ag1+, sò state trovate poche cellule batteriche è poche cellule batteriche sò state trovate sottu. E fibre di collagene ponu esse cunsiderate cum'è a struttura tissutale di a pelle di porcu (Figura 2G). Dopu u trattamentu cù a medicazione Ag1+ + EDTA/BC, e placche batteriche è e placche di fibre di collagene sottostanti eranu visibili (Figura 2I).
Visualizazione di u biofilm di Pseudomonas aeruginosa dopu u trattamentu cù medicazione d'argentu. (A-D) A viabilità batterica in i biofilm di Pseudomonas aeruginosa cresciuti nantu à a pelle di porcu hè stata visualizata cù u colorante di viabilità PrestoBlue 24 ore dopu u trattamentu cù medicazioni d'argentu o medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche. I batteri vivi sò rosa, i batteri non vitali è a pelle di porcu sò blu. (E) Quantificazione di i biofilm di Pseudomonas aeruginosa cresciuti nantu à a pelle di porcu (macchia rosa) cù microscopia elettronica à scansione Image Pro versione 10 (FI) è trattati cù una medicazione d'argentu o una medicazione di cuntrollu non antimicrobica per 24 ore. Barra di scala SEM = 5 µm. (J-M) I biofilm culuniali sò cresciuti nantu à i filtri è sò stati culurati cù u colorante reattivu PrestoBlue dopu 24 ore di incubazione cù medicazioni d'argentu.
Per determinà s'ellu u cuntattu strettu trà e medicazioni è i biofilm hà affettatu l'efficacità di e medicazioni, i biofilm culuniali posti nantu à una superficia piana sò stati trattati cù e medicazioni per 24 ore è dopu culuriti cù coloranti reattivi. U biofilm micca trattatu era di culore rosa scuru (Figura 2J). À u cuntrariu di i biofilm trattati cù medicazioni chì cuntenenu sali di Ag ossigenati (Figura 2K), i biofilm trattati cù medicazioni chì cuntenenu Ag1+ o Ag1+ + EDTA/BC anu mostratu bande di culurazione rosa (Figura 2L,M). Questa culurazione rosa indica a presenza di batteri viabili è hè assuciata à l'area di sutura in a medicazione. Queste zone cucite creanu spazii morti chì permettenu à i batteri in u biofilm di sopravvive.
Per valutà l'efficacità di e medicazioni d'argentu in vivo, e ferite escise à spessore pienu di topi infettati cù biofilm maturi di S. aureus è P. aeruginosa sò state trattate cù medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche o medicazioni d'argentu. Dopu à 3 ghjorni di trattamentu, l'analisi macroscopica di l'immagine hà mostratu dimensioni di e ferite più chjuche quandu trattate cù medicazioni di sale ossigenatu paragunate à e medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche è altre medicazioni d'argentu (Figura 3A-H). Per cunfirmà queste osservazioni, e ferite sò state prelevate è l'area di a ferita è a riepitelizazione sò state quantificate nantu à sezioni di tissutu colorate cù ematossilina è eosina utilizendu u software image pro versione 10 (Figura 3I-L).
L'effettu di e medicazioni d'argentu nantu à a superficia di a ferita è a riepitelizazione di e ferite infettate da biofilm. (A-H) Piccule cellule infettate cù biofilm di Pseudomonas aeruginosa (A-D) è Staphylococcus aureus (E-H) dopu à trè ghjorni di trattamentu cù una medicazione di cuntrollu non antimicrobica, una medicazione di sale Ag ossigenatu, una medicazione Ag1+ è una medicazione Ag1+. Immagini macroscopiche rappresentative. Ferite di topi cù medicazione Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Infezione rappresentativa da Pseudomonas aeruginosa, sezioni istologiche colorate cù ematossilina è eosina, aduprate per quantificà l'area di a ferita è a rigenerazione epiteliale. Quantificazione di l'area di a ferita (M, O) è percentuale di riepitelizazione (N, P) di ferite infettate da biofilm di Pseudomonas aeruginosa (M, N) è Staphylococcus aureus (O, P) (per gruppu di trattamentu n = 12). I grafichi mostranu l'errore standard mediu +/-. * significa p = < 0,05 ** significa p = < 0,01; Scala macroscopica = 2,5 mm, scala istologica = 500 µm.
A quantificazione di l'area di a ferita in e ferite infettate da u biofilm di Pseudomonas aeruginosa (Figura 3M) hà dimustratu chì e ferite trattate cù sali d'argentu ossigenu avianu una dimensione media di a ferita di 2,5 mm2, mentre chì a medicazione di cuntrollu non antimicrobica avia una dimensione media di a ferita di 3,1 mm2, ciò chì ùn hè micca veru. hà righjuntu una significatività statistica (Figura 3M). p = 0,423). E ferite trattate cù Ag1+ o Ag1+ + EDTA/BC ùn anu mostratu alcuna riduzione di l'area di a ferita (3,1 mm2 è 3,6 mm2, rispettivamente). U trattamentu cù medicazione di sali d'argentu ossigenati hà prumuvutu a riepitelizazione in misura maggiore chè a medicazione di cuntrollu non antimicrobica (34% è 15%, rispettivamente; p = 0,029) è Ag1+ o Ag1+ + EDTA/BC (10% è 11%) (Figura 3N). . , rispettivamente).
Tendenze simili in a zona di a ferita è a rigenerazione epiteliale sò state osservate in e ferite infettate da biofilm di S. aureus (Figura 3O). E medicazioni chì cuntenenu sali d'argentu ossigenati anu riduttu a zona di a ferita (2,0 mm2) di u 23% paragunatu à a medicazione di cuntrollu non antimicrobica (2,6 mm2), ancu s'è sta riduzione ùn era micca significativa (p = 0,304) (Fig. 3O). Inoltre, a zona di a ferita in u gruppu di trattamentu Ag1+ hè stata ligeramente ridutta (2,4 mm2), mentre chì a ferita trattata cù medicazione Ag1+ + EDTA/BC ùn hà micca riduttu a zona di a ferita (2,9 mm2). I sali d'ossigenu di Ag anu ancu prumuvutu a riepitelizazione di e ferite infettate da biofilm di S. aureus (31%) in misura maggiore chè quelle trattate cù medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche (12%, p = 0,003) (Figura 3P). A medicazione Ag1+ (16%, p = 0,903) è a medicazione Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0,965) anu mostratu livelli di rigenerazione epiteliale simili à u cuntrollu.
Per visualizà l'effettu di e medicazioni d'argentu nantu à a matrice di biofilm, hè stata realizata una culurazione cù ioduro Toto 1 è Syto 60 (Fig. 4). L'ioduru Toto 1 hè un colorante impermeabile à e cellule chì pò esse adupratu per visualizà accuratamente l'acidi nucleichi extracellulari, chì sò abbundanti in l'EPS di i biofilm. Syto 60 hè un colorante permeabile à e cellule adupratu cum'è contrastu16. L'osservazioni di l'ioduru Toto 1 è Syto 60 in ferite inoculate cù biofilm di Pseudomonas aeruginosa (Figura 4A-D) è Staphylococcus aureus (Figura 4I-L) anu dimustratu chì dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù medicazione, l'EPS in u biofilm era significativamente riduttu. chì cuntene sali ossigenati Ag è Ag1+ + EDTA/BC. E medicazioni Ag1+ senza cumpunenti antibiofilm supplementari anu riduttu significativamente u DNA liberu di e cellule in e ferite inoculate cù Pseudomonas aeruginosa, ma eranu menu efficaci in e ferite inoculate cù Staphylococcus aureus.
Imaging in vivo di biofilm di ferita dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù medicazioni di cuntrollu o d'argentu. Imagine cunfocali di Pseudomonas aeruginosa (A-D) è Staphylococcus aureus (I-L) colorate cù Toto 1 (verde) per visualizà l'acidi nucleici extracellulari, un cumpunente di i polimeri di biofilm extracellulari. Per colorà l'acidi nucleici intracellulari, aduprate Syto 60 (rossu). acidi. P. Microscopia elettronica à scansione di ferite infettate da biofilm di Pseudomonas aeruginosa (E-H) è Staphylococcus aureus (M-P) dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù medicazioni di cuntrollu è d'argentu. Barra di scala SEM = 5 µm. Barra di scala di l'imaging cunfocale = 50 µm.
A microscopia elettronica à scansione hà dimustratu chì i topi inoculati cù culonie di biofilm di Pseudomonas aeruginosa (Figura 4E-H) è Staphylococcus aureus (Figura 4M-P) avianu significativamente menu batteri in e so ferite dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù tutte e medicazioni d'argentu.
Per valutà l'effettu di e medicazioni d'argentu nantu à l'inflammazione di e ferite in i topi infettati da biofilm, sezioni di ferite infettate da biofilm trattate cù medicazioni di cuntrollu o d'argentu per 3 ghjorni sò state colorate immunoistochimicamente utilizendu anticorpi specifichi per neutrofili è macrofagi. Determinazione quantitativa di neutrofili è macrofagi internamente. tissutu di granulazione. Figura 5). Tutte e medicazioni d'argentu anu riduttu u numeru di neutrofili è macrofagi in e ferite infettate da Pseudomonas aeruginosa paragunatu à e medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche dopu à trè ghjorni di trattamentu. Tuttavia, u trattamentu cù a medicazione di sale d'argentu ossigenatu hà risultatu in una maggiore riduzione di neutrofili (p = <0,0001) è macrofagi (p = <0,0001) paragunatu à altre medicazioni d'argentu testate (Figura 5I,J). Ancu se Ag1+ + EDTA/BC hà avutu un effettu più grande nantu à u biofilm di e ferite, hà riduttu i livelli di neutrofili è macrofagi in misura minore chè a medicazione Ag1+. Ferite moderate infettate cù biofilm di S. aureus sò state osservate ancu dopu a medicazione cù ossisoli Ag (p = <0,0001), Ag1+ (p = 0,0008) è Ag1++ EDTA/BC (p = 0,0043) paragunatu à u cuntrollu. Tendenze simili sò osservate per a neutropenia. bendaggio (Fig. 5K). Tuttavia, solu a medicazione cù sali di Ag ossigenati hà mostratu una riduzione significativa di u numeru di macrofagi in u tissutu di granulazione paragunatu à u cuntrollu in ferite infettate cù biofilm di S. aureus (p = 0,0339) (Figura 5L).
I neutrofili è i macrofagi sò stati quantificati in ferite infettate da biofilm di Pseudomonas aeruginosa è Staphylococcus aureus dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù medicazioni di cuntrollu non antimicrobiche o d'argentu. I neutrofili (AD) è i macrofagi (EH) sò stati quantificati in sezioni di tissutu colorate cù anticorpi specifichi per neutrofili o macrofagi. Quantificazione di neutrofili (I è K) è macrofagi (J è L) in ferite infettate da biofilm di Pseudomonas aeruginosa (I è J) è Staphylococcus aureus (K & L). N = 12 per gruppu. I grafichi mostranu a media +/- errore standard, valori di significatività paragunati à a medicazione di cuntrollu non antibatterica, * significa p = < 0,05, ** significa p = < 0,01; *** significa p = < 0,001; indica p = <0,0001).
Avemu tandu valutatu l'effettu di e medicazioni d'argentu nantu à a guarigione indipendente da l'infezzione. E ferite escisionali micca infette sò state trattate cù una medicazione di cuntrollu non antimicrobica o una medicazione d'argentu per 3 ghjorni (Figura 6). Trà e medicazioni d'argentu testate, solu e ferite trattate cù a medicazione di sale ossigenatu sò apparse più chjuche nantu à l'imaghjini macroscopiche chè e ferite trattate cù u cuntrollu (Figura 6A-D). A quantificazione di l'area di a ferita utilizendu l'analisi istologica hà dimustratu chì l'area media di a ferita dopu u trattamentu cù a medicazione Ag oxysols era di 2,35 mm2 paragunata à 2,96 mm2 per e ferite trattate cù u gruppu di cuntrollu, ma sta differenza ùn hà micca righjuntu a significatività statistica (p = 0,488) (Fig. 6I). In cuntrastu, ùn hè stata osservata alcuna riduzione di l'area di a ferita dopu u trattamentu cù medicazioni Ag1+ (3,38 mm2, p = 0,757) o Ag1+ + EDTA/BC (4,18 mm2, p = 0,054) paragunata à u gruppu di cuntrollu. Una rigenerazione epiteliale aumentata hè stata osservata cù a medicazione Ag oxysol paragunata à u gruppu di cuntrollu (30% vs. 22%, rispettivamente), ancu s'ellu ùn hà micca righjuntu a significatività (p = 0,067), questu hè abbastanza significativu è cunfirma i risultati precedenti. Una medicazione cù oxysol prumove a riepitelizazione. - Epitelizazione di ferite micca infette17. In cuntrastu, u trattamentu cù medicazioni Ag1+ o Ag1+ + EDTA/BC ùn hà avutu alcun effettu o hà mostratu una diminuzione di a riepitelizazione paragunata à u cuntrollu.
Effettu di a medicazione d'argentu per e ferite nantu à a guarigione di e ferite in topi micca infettati cù resezione cumpleta. (AD) Immagini macroscopiche rappresentative di e ferite dopu à trè ghjorni di trattamentu cù una medicazione di cuntrollu non antimicrobica è una medicazione d'argentu. (EH) Sezioni di ferite rappresentative colorate cù ematossilina è eosina. A quantificazione di l'area di a ferita (I) è a percentuale di riepitelizazione (J) sò state calculate da sezioni istologiche à u puntu mediu di a ferita utilizendu un software di analisi di l'imagine (n = 11-12 per gruppu di trattamentu). I grafichi mostranu a media +/- errore standard. * significa p = <0,05.
L'argentu hà una longa storia d'usu cum'è terapia antimicrobica in a guarigione di e ferite, ma e numerose formulazioni è metudi di consegna diversi ponu purtà à differenze in l'efficacia antimicrobica 18. Inoltre, e proprietà antibiofilm di sistemi specifici di consegna d'argentu ùn sò micca cumpletamente capite. Ancu s'è a risposta immune di l'ospite hè relativamente efficace contr'à i batteri planctonici, hè generalmente menu efficace contr'à i biofilm 19. I batteri planctonici sò facilmente fagocitati da i macrofagi, ma in i biofilm, e cellule aggregate ponenu prublemi supplementari limitendu a risposta di l'ospite à u puntu chì e cellule immunitarie ponu subisce apoptosi è liberà fattori proinflamatori per rinfurzà a risposta immune 20. Hè statu osservatu chì alcuni leucociti ponu penetrà i biofilm 21 ma ùn sò micca capaci di fagocitosà i batteri una volta chì sta difesa hè compromessa 22. Un approcciu olisticu deve esse adupratu per sustene a risposta immune di l'ospite contr'à l'infezione da biofilm di a ferita. U debridement di e ferite pò disturbà fisicamente u biofilm è rimuovere a maiò parte di u bioburden, ma a risposta immune di l'ospite pò esse inefficace contr'à u biofilm restante, soprattuttu se a risposta immune di l'ospite hè compromessa. Cusì, e terapie antimicrobiche cum'è e medicazioni d'argentu ponu sustene a risposta immune di l'ospite è eliminà l'infezioni da biofilm. A cumpusizione, a cuncentrazione, a solubilità è u sustratu di consegna ponu influenzà l'efficacia antimicrobica di l'argentu. In l'ultimi anni, i progressi in a tecnulugia di trasfurmazione di l'argentu anu resu queste medicazioni più efficaci9,23. Cù l'avanzamentu di a tecnulugia di e medicazioni d'argentu, hè impurtante capisce l'efficacia di queste medicazioni in u cuntrollu di l'infezzione di a ferita è, ancu più impurtante, l'impattu di queste forme putenti d'argentu nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione.
In questu studiu, avemu paragunatu l'efficacità di duie medicazioni d'argentu avanzate cù e medicazioni d'argentu cunvinziunali chì producenu ioni Ag1+ contr'à i biofilm utilizendu diversi mudelli in vitro è in vivo. Avemu ancu valutatu l'effettu di queste medicazioni nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione indipendente da l'infezzione. Per minimizà l'influenza di a matrice di consegna, tutte e medicazioni d'argentu testate eranu cumposte di carbossimetilcellulosa.
A nostra valutazione preliminare di sti medicazioni d'argentu contr'à i biofilm culuniali di Pseudomonas aeruginosa è Staphylococcus aureus mostra chì, à u cuntrariu di e medicazioni tradiziunali Ag1+, duie medicazioni d'argentu avanzate, Ag1+ + EDTA/BC è sali d'Ag ossigenati, sò efficaci à 5. Uccidendu efficacemente i batteri di u biofilm in pochi ghjorni. Inoltre, sti medicazioni impediscenu a rifurmazione di u biofilm dopu à l'esposizione ripetuta à i batteri planctonici. A medicazione Ag1+ cuntene cloruru d'argentu, u listessu cumpostu d'argentu è a listessa matrice di basa cum'è Ag1+ + EDTA/BC, è hà avutu un effettu limitatu nantu à a viabilità batterica in u biofilm durante u listessu periodu. L'osservazione chì una medicazione Ag1+ + EDTA/BC era più efficace contr'à u biofilm chè una medicazione Ag1+ custituita da a listessa matrice è un cumpostu d'argentu sustene l'idea chì sò richiesti ingredienti supplementari per aumentà l'efficacia di u cloruru d'argentu contr'à u biofilm, cum'è hè statu signalatu in altrò15. Questi risultati sustenenu l'idea chì BC è EDTA ghjocanu un rolu supplementu chì cuntribuisce à l'efficacità generale di e medicazioni è chì l'assenza di questu cumpunente in e medicazioni Ag1+ pò avè cuntribuitu à a mancanza di dimustrà l'efficacità in vitro. Avemu trovu chì e medicazioni cù sali di Ag ossigenati chì producenu ioni Ag2+ è Ag3+ anu mostratu una efficacia antibatterica più forte chè Ag1+ è à livelli simili à Ag1+ + EDTA/BC. Tuttavia, per via di l'altu putenziale redox, ùn hè chjaru per quantu tempu l'ioni Ag3+ restanu attivi è efficaci contr'à i biofilm di e ferite è dunque meritanu ulteriori studii. Inoltre, ci sò parechje medicazioni diverse chì generanu ioni Ag1+ chì ùn sò state testate in questu studiu. Queste medicazioni sò cumposte da diversi cumposti d'argentu, concentrazioni è matrici di basa, chì ponu influenzà a consegna di ioni Ag1+ è a so efficacità contr'à i biofilm. Vale ancu a pena nutà chì ci sò parechji mudelli in vitro è in vivo diversi aduprati per valutà l'efficacità di e medicazioni per e ferite contr'à i biofilm. U tipu di mudellu adupratu, è ancu u cuntenutu di sale è proteine di i mezi aduprati in questi mudelli, influenzeranu l'efficacità di a medicazione. In u nostru mudellu in vivo, avemu lasciatu chì u biofilm maturassi in vitro è dopu l'avemu trasferitu à a superficia dermica di a ferita. A risposta immune di u topu ospitante hè relativamente efficace contr'à i batteri planctonici applicati à a ferita, furmendu cusì un biofilm mentre a ferita guarisce. L'aghjunta di biofilm maturu à una ferita limita l'efficacia di a risposta immune di l'ospite à a furmazione di biofilm permettendu à u biofilm maturu di stabilisce si in a ferita prima chì a guarigione possi cumincià. Cusì, u nostru mudellu ci permette di valutà l'efficacia di e medicazioni antimicrobiche nantu à i biofilm maturi prima chì e ferite cumincinu à guarisce.
Avemu ancu scupertu chì l'adattazione di a medicazione hà influenzatu l'efficacità di e medicazioni d'argentu nantu à i biofilm cultivati in vitro è a pelle porcina. U cuntattu strettu cù a ferita hè cunsideratu criticu per l'efficacità antimicrobica di a medicazione24,25. E medicazioni chì cuntenenu sali d'Ag ossigenati eranu in strettu cuntattu cù i biofilm maturi, risultendu in una riduzione significativa di u numeru di batteri viabili in u biofilm dopu à 24 ore. In cuntrastu, quandu sò state trattate cù medicazioni Ag1+ è Ag1+ + EDTA/BC, un numeru significativu di batteri viabili hè rimasu. Queste medicazioni cuntenenu suture longu à tutta a lunghezza di a medicazione, ciò chì crea spazii morti chì impediscenu u cuntattu strettu cù u biofilm. In i nostri studii in vitro, queste zone senza cuntattu anu impeditu l'uccisione di batteri viabili in u biofilm. Avemu valutatu a viabilità batterica solu dopu à 24 ore di trattamentu; Cù u tempu, à misura chì a medicazione diventa più saturata, ci pò esse menu spaziu mortu, riducendu l'area per questi batteri viabili. Tuttavia, questu mette in risaltu l'impurtanza di a cumpusizione di a medicazione, micca solu di u tipu d'argentu in a medicazione.
Mentre chì i studii in vitro sò utili per paragunà l'efficacità di diverse tecnulugie d'argentu, hè ancu impurtante capisce l'effetti di queste medicazioni nantu à i biofilm in vivo, induve u tissutu ospitante è e risposte immunitarie cuntribuiscenu à l'efficacità di e medicazioni contr'à i biofilm. L'effettu di queste medicazioni nantu à i biofilm di e ferite hè statu osservatu aduprendu a microscopia elettronica à scansione è a culurazione EPS di u biofilm aduprendu coloranti di DNA intracellulari è extracellulari. Avemu trovu chì dopu à 3 ghjorni di trattamentu, tutte e medicazioni eranu efficaci in a riduzione di u DNA senza cellule in e ferite infettate da biofilm, ma a medicazione Ag1+ era menu efficace in e ferite infettate da Staphylococcus aureus. A microscopia elettronica à scansione hà ancu dimustratu chì significativamente menu batteri eranu presenti in e ferite trattate cù e medicazioni d'argentu, ancu se questu era più pronunciatu cù a medicazione di sale Ag ossigenatu è a medicazione Ag1+ + EDTA/BC paragunata à a medicazione Ag1+. Questi dati mostranu chì e medicazioni d'argentu testate anu avutu diversi gradi d'impattu nantu à a struttura di u biofilm, ma nisuna di e medicazioni d'argentu hè stata capace di eradicà u biofilm, ciò chì sustene a necessità di un approcciu olisticu à u trattamentu di l'infezioni di e ferite da biofilm; usu di braccialetti d'argentu. U trattamentu hè precedutu da un debridement fisicu per rimuovere a maiò parte di u biofilm.
E ferite croniche sò spessu in un statu d'inflammazione severa, cù cellule infiammatorie in eccessu chì restanu in u tissutu di a ferita per un periodu di tempu prolongatu, causendu danni à i tessuti è riducendu l'ossigenu necessariu per un metabolismu cellulare efficiente è a funzione in a ferita26. I biofilm aggravanu questu ambiente ostile di a ferita influenzendu negativamente a guarigione in una varietà di modi, cumprese l'inibizione di a proliferazione è a migrazione cellulare è l'attivazione di citochine proinfiammatorie27. À misura chì e medicazioni d'argentu diventanu più efficaci, hè impurtante capisce l'impattu ch'elli anu nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione.
Hè interessante nutà chì, ancu s'è tutte e medicazioni d'argentu anu influenzatu a cumpusizione di u biofilm, solu e medicazioni à i sali d'argentu ossigenati anu aumentatu a riepitelizazione di ste ferite infettate. Quessi dati sustenenu i nostri risultati precedenti17 è quelli di Kalan et al. (2017)28, chì anu dimustratu boni profili di sicurezza è tossicità di i sali d'argentu ossigenati, postu chì e concentrazioni più basse d'argentu eranu efficaci contr'à i biofilm.
U nostru studiu attuale mette in risaltu e differenze in a tecnulugia di l'argentu trà e medicazioni antimicrobiche d'argentu è l'impattu di sta tecnulugia nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione indipendente da l'infezzione. Tuttavia, questi risultati differenu da studii precedenti chì mostranu chì a medicazione Ag1+ + EDTA/BC hà migliuratu i parametri di guarigione di l'arechje di cunigliulu ferite in vivo. Tuttavia, questu pò esse duvutu à differenze in i mudelli animali, i tempi di misurazione è i metudi di applicazione batterica29. In questu casu, e misurazioni di a ferita sò state pigliate 12 ghjorni dopu a ferita per permette à l'ingredienti attivi di a medicazione di agisce nantu à u biofilm per un periodu di tempu più longu. Questu hè sustinutu da un studiu chì hà dimustratu chì l'ulcere di e gambe clinicamente infettate trattate cù Ag1+ + EDTA/BC inizialmente sò aumentate di dimensione dopu una settimana di trattamentu, è dopu durante e successive 3 settimane di trattamentu cù Ag1+ + EDTA/BC è in 4 settimane di usu di farmaci non antimicrobici. Medicazioni CMC per riduce a dimensione di l'ulcere30.
Certe forme è concentrazioni d'argentu sò state dimustrate prima cum'è citotossiche in vitro 11, ma questi risultati in vitro ùn si traducenu micca sempre in effetti avversi in vivo. Inoltre, i progressi in a tecnulugia di l'argentu è una megliu comprensione di i cumposti d'argentu è di e concentrazioni in e medicazioni anu purtatu à u sviluppu di parechje medicazioni d'argentu sicure è efficaci. Tuttavia, cù l'avanzà di a tecnulugia di e medicazioni d'argentu, hè impurtante capisce l'impattu di queste medicazioni nantu à l'ambiente di a ferita 31,32,33. Hè statu signalatu prima chì l'aumentu di u tassu di riepitelizazione currisponde à una maggiore proporzione di macrofagi M2 antiinflamatori paragunatu à u fenotipu M1 proinflamatoriu. Questu hè statu nutatu in un mudellu di topo precedente induve e medicazioni per ferite à l'idrogel d'argentu sò state paragunate cù a sulfadiazina d'argentu è l'idrogel non antimicrobici 34.
E ferite croniche ponu presentà una inflammazione eccessiva è hè statu osservatu chì a presenza di neutrofili in eccessu pò esse dannosa per a guarigione di e ferite35. In un studiu realizatu nantu à topi cù una deplezione di neutrofili, a presenza di neutrofili hà ritardatu a riepitelizazione. A presenza di neutrofili in eccessu porta à alti livelli di proteasi è spezie reattive di l'ossigenu, cum'è u superossidu è u perossidu d'idrogenu, chì sò assuciati à ferite croniche è à guarigione lenta37,38. In listessu modu, un aumentu di u numeru di macrofagi, se micca cuntrullatu, pò purtà à un ritardu in a guarigione di e ferite39. Questu aumentu hè particularmente impurtante se i macrofagi ùn sò micca capaci di passà da un fenotipu pro-inflammatoriu à un fenotipu pro-guarigione, ciò chì face chì e ferite ùn riescenu micca à esce da a fase inflammatoria di a guarigione40. Avemu osservatu una diminuzione di neutrofili è macrofagi in e ferite infettate da biofilm dopu à 3 ghjorni di trattamentu cù tutte e medicazioni d'argentu, ma a diminuzione era più pronunciata cù e medicazioni à base di sale ossigenatu. Questa diminuzione pò esse un risultatu direttu di a risposta immune à l'argentu, una risposta à a diminuzione di a carica biologica, o a ferita chì hè in una fase più avanzata di guarigione è dunque e cellule immunitarie in a ferita sò ridotte. Riduce u numeru di cellule infiammatorie in a ferita pò mantene un ambiente propiziu à a guarigione di e ferite. U mecanismu d'azione di cumu l'ossisali di Ag prumove a guarigione indipendente da l'infezzione ùn hè chjaru, ma a capacità di l'ossisali di Ag di pruduce ossigenu è di distrughje i livelli dannosi di perossidu d'idrogenu, un mediatore di l'inflammazione, pò spiegà questu è richiede ulteriori studii17.
E ferite infette croniche chì ùn guariscenu micca rapprisentanu un prublema sia per i medichi sia per i pazienti. Ancu s'è parechje medicazioni pretendenu esse efficaci antimicrobiche, a ricerca si cuncentra raramente nantu à altri fattori chjave chì influenzanu u microambiente di a ferita. Stu studiu mostra chì diverse tecnulugie d'argentu anu una diversa efficacia antimicrobica è, soprattuttu, diversi effetti nantu à l'ambiente di a ferita è a guarigione, indipendentemente da l'infezione. Ancu s'è questi studii in vitro è in vivo mostranu l'efficacia di queste medicazioni in u trattamentu di l'infezioni di e ferite è in a prumuzione di a guarigione, sò necessarii studii cuntrullati aleatorii per valutà l'efficacia di queste medicazioni in a clinica.
I datasets utilizati è/o analizati durante u studiu attuale sò dispunibili da l'autore currispundente nantu à dumanda raghjonevule.
Data di publicazione: 15 di lugliu di u 2024